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研究T细胞的朋友们,你们可能最开始就得选择无血清培养基!

2026-05-22 10:17 来源:admin 点击:74

耿同学最近是杀疯了,已经连续干倒或即将干倒同济大学、上海大学等多所院校多名学术大佬。但他说还有一批杰青的造假数据等待曝光...估计现在搞得心里有鬼的伪大佬们很多人都睡不好觉了。

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我是非常赞同耿同学的想法和做法的——学生混个毕业,水个学位搞点数据优化的小动作可以理解,但是靠造假升职拿帽子继续在学术界糊弄就不行了!必须得干!——相信一大波认真努力搞科研的朋友们也是这么认为的!

为什么扯耿同学?是不是跑题了?还是想蹭流量?
并没有跑题!蹭流量嘛?能蹭当然蹭!其实我想说的是,在当下耿同学点燃的学术打假的星星之火之际,我们每个科研工作者们(不包括我们,我们是科研擦边者,主要给客户提供实验试剂、代做实验啥的)都要端正自己的态度,努力的避免让自己的科研陷入艰难的境地。一个很好的努力方式就是认真努力做好研究方案设计!在早期准备阶段就把各种潜在难度和风险判断准确,避免将来走到关键阶段后,要推翻以前的研究设想。否则到那时候,已经做了一批结果了,放弃掉吗?那还能正常毕业吗?还能正常结题吗?还能晋升吗?那小心思、小动作甚至大动作不就“顺其自然”被逼出来了...
无血清培养基vs含血清培养基
做T细胞基础研究的朋友们可能很多都习惯了当下实验室的成熟的传统的培养方式,即用含血清的培养基来培养T细胞。这可以说是路径依赖,当然也可以说没必要折腾新的培养体系,好比去修改屎山代码里面的一段看似无用的字符串,反而徒增风险。但请各位朋友们务必留意一下自己课题当下或将来的目标和应用场景,如果有涉及工业生产和向临床应用做转化,在你的早期的科研阶段,就必须考虑T细胞无血清培养基了。

一、无血清培养基的一些问题

批次差异明显:不同批次血清成分不同,可能导致T细胞增殖、活化、分化状态差异。实验可重复性受影响:对于研究细胞代谢、细胞因子分泌、转录组变化等精细指标,血清中的未知成分可能成为干扰因素。可能引入外源污染风险:动物源成分可能带来病毒、支原体、内毒素或其他未知风险,尽管商业血清通常经过检测。不利于临床转化:如果未来目标是细胞治疗或GMP生产,动物血清通常不被鼓励使用,后续需要重新开发无血清或无动物源体系。

二、T细胞无血清培养基及其优势

2.1 T细胞无血清培养基
顾名思义,是指不添加动物血清或人血清的培养体系。它通常包含明确配方的营养成分,例如:氨基酸、维生素、糖类、无机盐和缓冲体系、脂质、胆固醇或脂肪酸载体、重组蛋白或人工替代成分、支持T细胞增殖和活化的辅助因子等。需要注意的是,“无血清”并不等于“成分完全已知”。有些产品属于化学成分明确培养基,有些则只是“不含血清”,但仍可能含有蛋白水解物、白蛋白或其他复杂组分。

2.2 T细胞无血清培养基优势
2.2.1 成分更可控,重复性更好
无血清培养基减少了血清中未知成分的干扰。对于T细胞活化、耗竭、代谢重编程、记忆分化等研究,培养体系越清晰,越有利于解释实验结果。
例如研究某种药物是否影响T细胞功能时,如果培养体系中含有复杂血清成分,就可能存在额外变量。无血清体系可以提高结果的可信度。

2.2.2 更接近转化研究和临床生产要求
在CAR-T、TCR-T、TIL等细胞治疗临床前研究中,培养体系不仅要支持细胞扩增,还要考虑未来能否进入GMP生产。如果早期研究一直使用FBS,到后期转化时再换成无血清培养基,可能出现:扩增效率变化、T细胞表型改变、细胞杀伤功能不同、细胞因子分泌谱变化、工艺需要重新优化。因此,如果项目本身具有明确转化目标,基础阶段就使用无血清培养基可以减少后续工艺迁移成本。

2.2.3 降低动物源成分带来的风险
无血清体系可减少动物源成分,降低潜在病原体、异种蛋白或免疫原性物质的引入风险。这一点在临床级细胞制备中尤其重要。

2.2.4 有利于标准化和质量控制

无血清培养基通常批次稳定性更好,适合建立标准化培养流程。对于多中心研究、药效评价、细胞产品开发等场景,这一点非常重要。

哪些具体场景选无血清培养基?

场景一:纯机制探索研究(这都写出来,自封一个良心企业)

如果研究目标是基础免疫学机制,例如:某个信号通路对T细胞活化的影响、某个转录因子调控T细胞分化、某种细胞因子诱导T细胞功能变化、小鼠模型中T细胞体外短期刺激实验,那么无血清培养基不是绝对必要。

传统含血清体系仍然可以使用,尤其是在已有成熟实验体系、重复性良好、文献基础充分的情况下。此时更重要的是:保持同一批次血清、设置严格对照、记录血清品牌和批号、避免在关键实验中频繁更换培养体系。不过,如果研究内容与代谢、分泌因子、膜脂组成或药物反应有关,无血清体系会更有优势,因为它减少了复杂背景干扰。

场景二:药物筛选或功能评价

如果实验用于评价某种药物、抗体、小分子或基因编辑策略对T细胞功能的影响,无血清培养基更值得考虑。原因是血清可能结合药物、改变药物有效浓度,或者自身含有影响T细胞状态的因子。无血清体系能提高药效评价的可解释性。

但也要注意,完全无血清的环境未必代表体内真实环境。因此有时可以采用“双体系验证”:含血清体系验证生理相关性、无血清体系验证机制清晰性和可重复性、

场景三:具有明确临床转化目标的临床前研究

如果研究方向是CAR-T、TCR-T、TIL、Treg治疗或其他免疫细胞治疗,那么建议尽早引入无血清或临床级培养体系。原因很简单:越早接近未来生产工艺,后期变更成本越低。

在细胞治疗研发中,培养基不是简单的“耗材”,而是工艺的一部分。它会影响细胞扩增倍数、CD4/CD8比例、中央记忆T细胞比例、终末分化程度、耗竭标志物表达、杀伤能力、持久性、安全性评价结果。如果早期数据全部来自FBS体系,而临床申报前必须切换培养基,原有结果可能需要重新确认。因此,对于转化导向项目,无血清体系通常更合适。

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CAR-T细胞治疗流程 (https://www.mdpi.com/2072-6694/16/3/623)

吉诺生物-T细胞无血清培养基
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一、产品特征

    • 高效:经优化的无血清培养基,细胞培养效率更高;性能优异,支持T细胞快速增殖和高密度培养,可用于大规模工艺流程
    • 适用性强:适合于多种T细胞激活方法,可支持较长周期的稳定培养(>14天)
    • 安全:无血清,无异源体,原材料经严格检测,成分安全可靠;

    二、产品性质

    2.1 基本质控指标

    • 理化:外观检查,pH(6.9-7.6),无菌(阴性),内毒素(小于1EU/mL),渗透压(280-320mOsm/kg);

    • 生物学活性检测:细胞培养检测

    2.2 产品保存与运输

    T细胞无血清基础培养基:存储于2-8℃,有效期12m;冰袋低温运输

    2.3 产品使用

    自行配置完全培养基:配制好的完全培养基存储于2-8℃环境,4周内用完。

    三、产品效果
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    图1 T细胞活细胞数量比较

    吉诺生物培养基的扩培效能前期略低于竞品培养基-T,后期无显著差别(图1); 吉诺生物培养基杀伤效能明显优于于竞品培养基-T图2),且细胞形态和数量变化更明显(凋亡,空洞状,图3-4)。

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    图2 吉诺生物无血清培养基培养的T细胞的杀伤效率比较
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    图3 吉诺生物无血清培养基培养的T细胞的杀伤能力比较(镜检)
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    图4 T细胞杀伤效果荧光图